核酸试剂污染
A. 病毒核酸(DNA/PNA)快速提取试剂是不是违禁品
不是,实验室用的,可以买到的
B. 用于观察核酸在细胞中分布的试剂是
Feulgen反应来DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌自呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团),所以凡含有DNA的部位,就呈紫红色。而RNA用此法处理后则分解。
C. 核酸试剂里的什么成分与氯相结合产生有毒气体
化氢酶一分钟能催化分解万个过氧化氢分子;3)大多数酶的催化反应都在常温常压下进行.高温反要引起酶的破坏;4)酶的催化作用易受环境中PH值的影响. 至今已发展一、二千种的酶,它们的催化反应过程多种多样.根据催化反应的过程大致可分为六类:1)氧化还原酶(Oxido-rectase);2)转移酶(Transferase);3)水解酶(Hydrolase);4)裂合酶(Lyase);5)异构酶(Isomerase);6)连接酶(Ligase). 酶在生理学、医药、农业、工业等方面都有重大意义.酶制剂的品种日新月异,应用也日益广泛. 酶的性质不很稳定,易受各种因素的影响而被破坏,丧失活力.要较好地保存,关键在于水分和温度,水分越高,越不稳定;温度越高,越易被破坏.一般需在低温处(+4.C以下,有的要求在-20.C以下)保存,但即使干燥冷藏,长期贮存后仍能逐渐降低或丧失其活性而变质.所以酶制剂大多规定一定的贮存期.甘油酯及磷脂 1)甘油酯(Glyceride)通常是指甘油和脂肪酸(饱和的和不饱和的)经酯化所生成的酯类,根据结合脂肪酸的分子数目可分为甘油一脂肪酸酯C3H5(OH)2(OCOR),甘油二脂肪酸酯C3H5(OH)(OCOR)2和甘油三脂肪酸酯C3H5(OCOR)3.高碳数的脂肪酸甘油酯广泛存在于动植物的组织中. 甘油酯是中性物质,不溶于水,能溶于有机溶剂,能被氢氧化钠水解,水解后生成脂肪酸的钠盐和甘油. 多数甘油酯性质稳定,在正常贮存中不易发生变质. 2) 磷脂(Phoxpholipid)为含一分子或多分子磷酸基团的类酯状物质,是生物体内主要成分,存在于脑、肝、蛋黄和大豆等组织中参加生化活动,磷脂中主要有卵磷脂和脑磷脂. 磷脂极易溶于有机溶剂(乙醚、苯、三氯甲烷等),部分溶于乙醇,极难溶于丙酮和乙酸乙酯.所有磷脂有亲水胶体的特性,接触水时就膨胀.易被碱性甚至被酸性的水溶液所水解. 磷脂在工业上广泛的用于乳化剂,脑磷脂可用于肝功能试验.科学上主要用于生化研究. 磷脂的理化性质不稳定,受潮受热易分解变质.大多数磷脂应防潮、冷冻保存.碱基、核苷及核苷酸碱基(Base)是核酸水解所产生的含氮杂环化合物.主要是嘧啶或嘌呤的衍生物. 核苷(Nucleoside)是由碱基、戊糖(D-核糖或2-脱氧-D-核糖)组成的化合物.通常为无色结晶,熔点较高,大多易溶于热水,在冷水中较难溶解.核苷酸(Nucleotide),是由核苷、磷酸组成的化合物,是核算的组成单位,可有核酸水解而得,也可以单体形式存在于生物体内.通常为无色结晶,熔点甚高,熔化前就可能分解.溶于水,但不溶于有机溶剂.除5^-鸟嘌呤核苷酸和肌苷酸有鲜味外,其它核苷酸均有酸味. 核苷及核苷酸少数品种用于食品工业及医药外,大多品种用于生化合成及研究. 核苷及核苷酸品种繁多,要求不一,稳定性各异,一般以防潮、阴凉或冷冻处保存为宜.多肽物质多肽(Polypeptide)是由很多分子的氨基酸通过酰胺键(即肽键)缩合而成的化合物,一般以10个以上氨基酸分子缩合的称为多肽(也有3个以上氨基酸分子缩合称为多肽的).由蛋白质水解制得,也可人工合成. 多肽大多性质不稳定,长期贮存宜防潮,放在4.C以下的地方.蛋白质蛋白质(Protein)是细胞组成的基本物质,为各种α-氨基酸借酰胺键(即肽键)连接起来,形成一类高分子量多肽(蛋白质与多肽至今还没有明确的界线).分子量很大可以达到数百万,甚至在千万以上,结构复杂,官能团性质多样.少数蛋白质已可以制成结晶状态.多数蛋白质可溶于水,而生成胶体溶液.不过,各种蛋白质的性质不同,在溶剂中溶解度也会不同.蛋白质的水溶液,振摇后能产生肥皂样的泡沫.一般煮沸蛋白质的水溶液,蛋白质即被凝固,浓乙醇也会使蛋白质凝固.蛋白质一般不溶于有机溶剂.蛋白质可以酶解或水解成为氨基酸. 蛋白质易受潮受热而分解、发霉、变质,一般均应防潮,对一些极易受温度影响而变质的蛋白质制品,需贮存于4.C的冷冻处.激素及甾族化合物 激素(Hormone)前称荷尔蒙,此词来源于希腊语,有刺激兴奋的意义.激素具有能维持动物体内各种生理机能活动和代谢过程的协调,以及促进生长和繁殖等作用. 激素在化学结构上可分为三大类:1)含氮激素,包括氨基酸衍生物(如甲状腺素等),蛋白质类化合物(如胰岛素等),胺类衍生物(如肾上腺素等);2)在族化合物,主要是性激素和肾上腺皮质激素;3)前列腺素,是不饱和脂肪酸类.最初,激素都由生物体内提取,现在大多数激素的化学结构都已知道,而且还可以人工合成. 对激素原来只限于动物,目前已发展到植物,称为植物激素(Plant hormone),也有称为植物生长调节剂(Plant growth regulator),如脱落酸、赤霉素等.植物激素绝大部分是从微生物或动物的尿中分离出来,而其结构及化学活性也简单得多.甾族化合物(Steroid),又称类固醇,范围很广,如胆甾醇、麦角甾醇,胆酸、维生素D、雄性激素、雌性激素、肾上腺皮质激素、皂素等均为甾族化合物,广泛分布于动植物中. 激素与甾族化合物品种很多,在贮存上,一般需防潮避光.对有些激素,特别对蛋白质一类的激素,还需在4.C以下冷冻保存.维生素及辅酶维生素(Vitamin),旧称维他命(一般在维生素后另加拉丁字母A、B、C、D……等字母,这仅表明是被发现的先后,与其结构无关,目前有些已改用化学名).维生素为生物生长和代谢所必需的微量有机物.大致可分为脂溶性维生素和水溶性维生素,前者能溶于脂肪,如A、D、E、K维生素等,后者能溶于水,如B族维生素和维生素C.B族维生素包括B1、B2、B6、B12、烟酸、叶酸、泛酸、胆碱等,它们大多数是某些辅酶的组成部分.现在许多维生素都可人工合成. 辅酶(Coenzyme),是某些酶催化作用中所必需的非蛋白质小分子有机物质.同辅基的区别是,通常与酶蛋白没有紧密结合.许多辅酶是维生素的衍生物,有些辅酶(如辅酶Ⅰ、Ⅱ等)可改用化学名. 维生素及辅酶,化学结构各异、物理性状不一.有些纯的维生素及辅酶需要避光冷藏.培养基 培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素.按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学
D. 人巨细胞病毒核酸检测试剂的使用范围有哪些
现恐友迷信HIV核酸(病载)检测今说说HIV核酸检测
核酸检测:HIVRNA基诊断(检测病毒遗传物质PCR)
HIV核酸检测定性定量两类前者用于HIV染辅助诊断者用于监测HIV染者病程进展抗病毒治疗效
用:PCR、套式或巢式PCR、逆转录PCR
基本原理:体外条件(至少1DNA引物dNTP缓冲液)DNA聚合酶催化合与模板DNA互补新链
意义:病毒核酸阳性般作诊断病毒染依据些病毒(巨细胞病毒艾滋病毒乙肝病毒)能说明宿主染状态急性、慢性或携带由于PCR敏性非高实验条件要求严格根据PCR试验结尚能确定病毒或现疾病关系该技术检测同标本诊断同病毒性疾病意义待进步评价
HIV RNA基PCR检测评价:优点:敏、特异目前使用病毒诊断技术敏技术;检测较量标本;能检测与宿主细胞基组整合病毒核酸序列;用于检测目前能或易离病毒
缺点:诊断未知病毒染能力检测病毒核酸序列必须已经清楚;需要较仪器设备试验本较高;试验污染能性
其定性检测通根据扩增产物电泳图像判定结阳性结要进行核酸序列测定确定:
1、HIV核酸检测阴性, 报告本实验结阴性排除HIV染;
2、HIV核酸检测阳性, 作诊断HIV染辅助指标单独用于HIV染诊断;
3、报告核酸定性检测结应注明反应条件所使用引物序列
关于定量检测:
1、按照仪器读数报告结应注明使用试验、品种类品量;
2、测定结于低检测限应注明低检测限水平注意低于低检测限结能排除HIV染;
3、应附仪器打印数据
读要问贵且医都说核酸能单独确诊艾滋能排除艾滋我先讲艾滋病毒型
艾滋病病毒主要两型:HIV-1型HIV-2型各自亚型同区流行亚型同同亚型同区存定差异包括我内全球流行主要毒株HIV-1HIV-2主要局限于西部非洲西欧北美少量报告传染性致病性均较低说HIV-1种病毒比HIV-2更怕传染性更强致死率更高
HIV-1HIV-2氨基酸序列同源性约40%~60%HIV种变异型强病毒尤env基变异率高根据env基核酸序列差异性HIV-13亚型组13亚型:M亚型组包括A、 B、C、D、E、F、G、H、I、JK共11亚型N亚型组N亚型O亚型组O亚型各亚型env基核酸序列差异性平均30%
HIV-2至少A、B、C、D、E、F、G7亚型我HIV-1主要流行株已发现A、B(欧美B)、B′(泰B)、C、D、E、FG8亚型同流行重组型1999起部区发现并证实我少数HIV-2型染者
我知道HIV病毒进入体病毒繁殖情况病毒适应性同宿主差异关据《新英格兰医杂志》刊文报道患HIV-1HSV-2双重染妇抗HSV治疗与伐昔洛韦降低血液殖道泌物HIV-1RNA水平容易检测HIV核酸外服用肝炎类抗病毒药物及抗逆转录酶类药物均同程度降低血液HIV病毒核酸水平另极少数即使染HIV需服药能够体内病毒数控制50(拷贝/毫升)些通能通核酸检测判断HIV染aware猫
病毒载量实验关键步骤探针(信号扩增)或引物(靶扩增)与HIV-1 RNA杂交亚型变化导致基差异能够使HIV-1RNA定量现低效或错误些定量测定非B亚型特别A、G亚型明显低估现象HIV-1亚型世界各布均衡要依据HIV-1RNA绝水平做临床决定应所亚型同等进行定量注意同等检测等于同等定量关键部位引物错配能并完全使扩增停止能够显著降低扩增效率报道表明目前所用几种用于检测核酸试剂盒检测非B亚型HIV-1染者或者能检测或者能确定量病毒量HIV-2型HIV-1O组尚能定量检测其病毒RNA
先做结众所周知艾滋病难治疗原其基具高度变异性核酸检测检测病毒核酸序列必须已经清楚否现种现试剂未包含病毒核酸序列漏检加面说虽核酸假阴能却能排除却致命缺点
E. 去制造核酸试剂的工厂上班对人身体有危害吗
去制造核酸试剂的工厂上班对人身体有危害吗?你看也是没有太大危害。
F. dna-exitusplus 核酸污染清除试剂怎么样
使用方法因厂家不同而不同,下面是一氪生物技术的核酸纯化试剂使用方法及注意事项,供参考:
步骤一:使用无水乙醇与纯化水配制70%乙醇备用。
步骤二:从2-8℃冰箱中取出磁珠悬浮液,在室温条件下震荡混匀,平衡30min。
步骤三:将充分震荡混匀平衡后的磁珠加入待纯化酶反应或PCR反应产物溶液中。磁珠加入体积分别参考图1和图2,若待纯化产物体积不足,可用纯化水或10mM Tris-HCl(pH8.0)补充至相应体积。
步骤四:用移液器反复吹打10次,将磁珠悬浮液和PCR产物或者酶反应物充分混匀,室温条件下静置5min。
步骤五:将反应板放置在磁力架上,静置2min,待溶液澄清后将上清吸走,转入废液桶内。
步骤六:向反应板中加入200μL新鲜配置的70%的乙醇,室温静置30s。静置结束后将乙醇吸走,转入废液桶内。操作环节不可将反应板从磁力分离架上拿下或将磁珠吹散。
步骤七:重复步骤六。
步骤八:保持反应板置于磁力架上状态,室温开盖晾干2min以去除残存的乙醇。
步骤九:将反应板从磁力架上取下来,加入50μL洗脱液,移液器反复吹打10次混匀,室温静置3min。洗脱液加入量根据实际需要而定,但应不少于5μL。
步骤十:将反应板重新放置在磁力架上,室温静置1min,上清液即纯化后的DNA产物。
步骤十一:将上清液转入新的反应管或者反应板中,供下一步反应或检测使用。
G. 请问同一个厂房可以生产不同方法的体外诊断试剂么(生化免疫以及核酸的)过GMP的时候有什么区别
第四章 厂房与设备
第十二条 生物制品生产环境的空气洁净度级别应当与产品和生产操作相适应,厂房与设施不应对原料、中间体和成品造成污染。
第十三条 生产过程中涉及高危因子的操作,其空气净化系统等设施还应当符合特殊要求。
第十四条 生物制品的生产操作应当在符合下表中规定的相应级别的洁净区内进行,未列出的操作可参照下表在适当级别的洁净区内进行:
洁净度级别
生物制品生产操作示例
B级背景下的局部A级
附录一无菌药品中非最终灭菌产品规定的各工序
灌装前不经除菌过滤的制品其配制、合并等
C级
体外免疫诊断试剂的阳性血清的分装、抗原与抗体的分装
D级
原料血浆的合并、组分分离、分装前的巴氏消毒
口服制剂其发酵培养密闭系统环境(暴露部分需无菌操作)
酶联免疫吸附试剂等体外免疫试剂的配液、分装、干燥、内包装
第十五条 在生产过程中使用某些特定活生物体的阶段,应当根据产品特性和设备情况,采取相应的预防交叉污染措施,如使用专用厂房和设备、阶段性生产方式、使用密闭系统等。
第十六条 灭活疫苗(包括基因重组疫苗)、类毒素和细菌提取物等产品灭活后,可交替使用同一灌装间和灌装、冻干设施。每次分装后,应当采取充分的去污染措施,必要时应当进行灭菌和清洗。
第十七条 卡介苗和结核菌素生产厂房必须与其它制品生产厂房严格分开,生产中涉及活生物的生产设备应当专用。
第十八条 致病性芽胞菌操作直至灭活过程完成前应当使用专用设施。炭疽杆菌、肉毒梭状芽胞杆菌和破伤风梭状芽胞杆菌制品须在相应专用设施内生产。
第十九条 其它种类芽孢菌产品,在某一设施或一套设施中分期轮换生产芽胞菌制品时,在任何时间只能生产一种产品。
第二十条 使用密闭系统进行生物发酵的可以在同一区域同时生产,如单克隆抗体和重组DNA制品。
第二十一条 无菌制剂生产加工区域应当符合洁净度级别要求,并保持相对正压;操作有致病作用的微生物应当在专门的区域内进行,并保持相对负压;采用无菌工艺处理病原体的负压区或生物安全柜,其周围环境应当是相对正压的洁净区。
第二十二条 有菌(毒)操作区应当有独立的空气净化系统。来自病原体操作区的空气不得循环使用;来自危险度为二类以上病原体操作区的空气应当通过除菌过滤器排放,滤器的性能应当定期检查。
第二十三条 用于加工处理活生物体的生产操作区和设备应当便于清洁和去污染,清洁和去污染的有效性应当经过验证。
第二十四条 用于活生物体培养的设备应当能够防止培养物受到外源污染。
第二十五条 管道系统、阀门和呼吸过滤器应当便于清洁和灭菌。宜采用在线清洁、在线灭菌系统。密闭容器(如发酵罐)的阀门应当能用蒸汽灭菌。呼吸过滤器应为疏水性材质,且使用效期应当经验证。
第二十六条 应当定期确认涉及菌毒种或产品直接暴露的隔离、封闭系统无泄漏风险。
第二十七条 生产过程中被病原体污染的物品和设备应当与未使用的灭菌物品和设备分开,并有明显标志。
第二十八条 在生产过程中,如需要称量某些添加剂或成分(如缓冲液),生产区域可存放少量物料。
第二十九条 洁净区内设置的冷库和恒温室,应当采取有效的隔离和防止污染的措施,避免对生产区造成污染。
上面是GMP附录3中的要求,关键看你的体外试剂是哪一类的,一般没有问题。但最好
1.在相同房间生产时,分时段生产
2.不同房间生产,且最好使用不同的空调系统
H. GBS的泰普生物GBS核酸检测试剂盒
国内独抄家、技术领先;自主研发、专利技术;灵敏性高、特异性强;简便快捷、重复性好;
闭管操作、避免污染。
GBS感染的防治
预防GBS感染主要集中于从母婴双方消除GBS带菌状态(药物预防)着手或给新生儿保护性免疫(主/被动)。 导致围产期GBS感染的菌株分型不多,有针对性的进行疫苗研制,无疑是经济有效的防治手段。此外,还可减少抗生素的使用,从而减少GBS耐药性的发生。
目前,国外对孕32—34周的妇女已有采用特异GBS疫苗接种的报道,使其产生IgG抗体,证实可预防90%的新生儿感染及母亲产后GBS感染。
I. 核酸提取试剂属于体外诊断试剂吗属于医疗器械几类 1 2 3
核酸提取试剂属于诊断试剂的范围,I类