细胞霉菌污染图片
㈠ 我可怜的细胞,霉菌污染,有办法吗
你这下就惨了,长了霉菌细胞只能扔了,而且整个实验室和培养箱都要消毒专啊。我们实验室液发属生过类似事件,我把我们处理过程告诉你,希望对你有帮助:
首先消毒培养箱,如果你们有两个或以上培养箱就好办了,如果只有一个且还有很多其他细胞就麻烦点。只能暂时的放在超净台上。具体如下,中午将空调温度打到最高(也只有31度),超净台开紫外。下午早点来关紫外,将细胞转到超净台内,用75%酒精擦洗培养箱,再用无臭氧型可移动的紫外等照射半小时,然后将细胞放回即可(切记CO2瓶子阀门要关紧啊,不然气全跑光了)。
再消毒实验室,先把室内空调和消毒柜过滤网都拆下清洗,在锥形瓶内加点高锰酸钾,放在实验室地上,然后倒入甲醛,立马关门走人就可以了。
2天后再开门装好东西,和往常一样开始工作了。由于2天不能做事,个人细胞要先计划好,大家都可以休息两天。
㈡ 细胞被霉菌污染之后还能跑pcr吗
霉菌繁殖能力太来强,而且目前自没有特别有效又不会同时杀灭细胞的抗真菌药,要是细胞长霉你就别挣扎了.
一般染普通细菌如大肠杆菌或者葡萄球菌等,而且发现得早,情况尚不严重的话可以用抗生素冲击法:
如果发现有染菌迹象,立即更换新鲜培液,并加入普通使用浓度10倍的青-链霉素双抗(有现成商品出售,比如Invitrogen公司卖的是1000X的,你按1:100用就行),37度培养处理24-36小时,再换乘正常培液培养,不断观察细菌是否重新出现,如果没有重新出现,恭喜你成功了.
一定要早发现,早处理,细菌生长非常迅速,细菌生长的同时还会分泌毒素杀死你的细胞,晚一小时发现都会让成功率降低不少.不过一旦染菌以后还是别抱太大希望,双抗对细胞本身也有害,常常"同归于尽".有条件的话还是复苏或者买新的细胞吧
细胞污染最麻烦的还是支原体,因为显微镜看不到,光确定是否被支原体污染就要购买特殊试剂进行检验,非常麻烦.而且支原体对青霉素不敏感,除支原体的药价格很昂贵,往往比买新的细胞还贵
㈢ 被细菌和霉菌污染了的细胞还能要么该如何处理
霉菌繁殖能力太强,而且目前没有特别有效又不会同时杀灭细胞的抗真菌药,要是细胞长霉你就别挣扎了.........
一般染普通细菌如大肠杆菌或者葡萄球菌等,而且发现得早,情况尚不严重的话可以用抗生素冲击法:
如果发现有染菌迹象,立即更换新鲜培液,并加入普通使用浓度10倍的青-链霉素双抗(有现成商品出售,比如Invitrogen公司卖的是1000X的,你按1:100用就行),37度培养处理24-36小时,再换乘正常培液培养,不断观察细菌是否重新出现,如果没有重新出现,恭喜你成功了。
一定要早发现,早处理,细菌生长非常迅速,细菌生长的同时还会分泌毒素杀死你的细胞,晚一小时发现都会让成功率降低不少。不过一旦染菌以后还是别抱太大希望,双抗对细胞本身也有害,常常"同归于尽"......有条件的话还是复苏或者买新的细胞吧
细胞污染最麻烦的还是支原体,因为显微镜看不到,光确定是否被支原体污染就要购买特殊试剂进行检验,非常麻烦。而且支原体对青霉素不敏感,除支原体的药价格很昂贵,往往比买新的细胞还贵
㈣ 培养箱有霉菌污染怎么清理
1、降低贮藏温度和改进贮藏、加T方式等措施来减少霉菌毒素的污染;
2、利用碱炼法、活性白陶土和凹凸棒黏土或高龄土等吸附法、山苍子油熏蒸法等化学、物理学方法去除污染的霉菌毒素。
3、紫外光照法
短波紫外线属于可杀菌波段范围,能杀死细菌和病毒。UV - C( 尤其是波长254 nm)能穿透微生物的细胞膜,引起同一DNA链中相邻的胸腺嘧啶和胞嘧啶之间发生交联,导致DNA翻译和复制受阻,危害细胞的功能,最终导致细胞死亡。
它能通过杀灭表面微生物、刺激产生非生物胁迫效应等作用改善食品的保鲜品质。UV-C处理能够诱导新鲜农产品提高抗病性,产生功能成分,延缓成熟衰老,抑制病原微生物的生长繁殖。
(4)细胞霉菌污染图片扩展阅读
霉菌菌落的特征:
1、形态较大,质地疏松,外观干燥,不透明,呈现或松或紧的形状。
2、菌落和培养基间的连接紧密,不易挑取,菌落正面与反面的颜色、构造,以及边缘与中心的颜色、构造常不一致。
3、霉菌的菌丝有营养菌丝和气生菌丝的分化,而气生菌丝没有毛细管水,故它们的菌落必然与细菌或酵母菌的不同,较接近放线菌。
㈤ 如何检测培养细胞霉菌和细菌的污染
如何检测培养细胞霉菌和细菌的污染
1 霉菌污染后多数在培养液中形成白色或浅黄色漂浮物。一般肉眼可见,较易倍发现,短期内培养液多不浑浊,倒置显微镜下可见细胞之间有纵横交错穿行的丝状、管状及树枝状菌丝,并悬浮漂荡在培养液中。很多菌丝在高倍镜下可见到有链状排列的菌株;念珠菌或酵母菌形态呈卵形,散在细胞周边和细胞之间生长。有时通过显微镜观察可能发现瓶底外面生长的菌丝,不要错当培养瓶内的污染。瓶外的污染物,需及时用乙醇棉球擦洗清除,以防其通过瓶口传入瓶内。
2 培养细胞的污染一旦明确,多数将无法救治。如果污染的细胞不是具有重要价值,一般发现污染后应尽快弃之,以防污染扩大影响其他细胞。
3 如为霉菌污染可以考虑采用制霉菌素25ug/ml或酮康唑10ug/ml对细胞进行处理。
㈥ 复苏的乳腺癌细胞在第一次换液后一天间出现了大量絮状物(另一瓶无事),是霉菌污染吗原因是什么谢谢
你第一次换培养液是什么时候?复苏细胞应该在24H左右换一次液以去除DMSO,镜下观察,如果是真菌污染会有丝状物,细菌污染会有黑色小点做布郎运动,,,污染问题是细胞培养之首要问题,作多了就会有经验
㈦ 黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中,它可以通过食物链进入动物体内并蓄积,引起瘤变.某
(1)黄曲霉毒素AFB1是一种化学物质,属于化学类致癌因子.引起癌变的基回因是黄曲霉毒答素导致原癌基因和抑癌基因发生突变,导致正常细胞癌变.
(2)①由于甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶,说明甲菌中的DNA分子中含有控制解毒酶的基因,并完成了基因表达,所以过程l应选择甲菌液的细胞提取总RNA.
②由于解毒酶属于蛋白质,所以检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶,可用抗原-抗体杂交的方法.
(3)①本实验的两个自主量,分别是AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量.本实验中反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是B组.②经测定,某污染饲料中AFB1含量是100μg/kg,则每千克饲料应添加5克AFB1解毒酶,解毒效果最好,同时节约了成本.
(4)蛋白质工程的本质是通过基因改造或基因合成,所以设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列,从而提高酶的活性.
故答案为:
(1)化学原癌基因和抑癌基因
(2)①甲甲菌液细胞含解毒酶,意味着完成了基因表达
②抗原---抗体杂交
(3)①B②5
(4)脱氧核苷酸序列
㈧ 细胞转瓶培养时,瓶壁出现大量圆形的白点是霉菌吗
一般白色的大多是真菌污染,其中以霉菌最常见.
常见的污染如下:
1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理
2、霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞。,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作
3、支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。
4、黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。
5、真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
6、原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。
㈨ 细胞培养中如何避免霉菌污染
1、实验前对培养皿(干热灭菌)、培养基消毒(高压蒸汽灭菌)
2、保证实验室的无菌环境
㈩ 怎样处理细胞培养时的霉菌污染
1 霉菌污染后多数在培养液中形成白色或浅黄色漂浮物。一般肉眼可见,较易倍发现,短期内培养液多不浑浊,倒置显微镜下可见细胞之间有纵横交错穿行的丝状、管状及树枝状菌丝,并悬浮漂荡在培养液中。很多菌丝在高倍镜下可见到有链状排列的菌株;念珠菌或酵母菌形态呈卵形,散在细胞周边和细胞之间生长。有时通过显微镜观察可能发现瓶底外面生长的菌丝,不要错当培养瓶内的污染。瓶外的污染物,需及时用乙醇棉球擦洗清除,以防其通过瓶口传入瓶内。
2 培养细胞的污染一旦明确,多数将无法救治。如果污染的细胞不是具有重要价值,一般发现污染后应尽快弃之,以防污染扩大影响其他细胞。
3 如为霉菌污染可以考虑采用制霉菌素25ug/ml或酮康唑10ug/ml对细胞进行处理。