抗生素滥用与dna污染

① dna结构不同所以抗生素作用效果不同 为什么

可以做150g/ml、 200g/ml、300g/ml三个浓度进行筛选。为分析转化的功能和表达需要DNA稳定转染至宿主细胞染色体.外源基因进入细胞后,部分能够通过细胞质进入细胞核内,根据细胞类型,至多80%的进入 核内的外源DNA得到瞬时表达.极少数情况下,进入细胞的外源DNA通过系列非同源性分子间重组核连接,形成巨大的***结构最终整合进细胞染色体.细胞 基因组自由部分表达,所以整合并不一定意味着表达,只有整合到表达区的基因才会表达,而且整合到不同的染色体区段的外源基因的表达的量也是不同的.由于摄 取、整合、表达外源基因是小概率事件,通常根据新表型筛选稳定转染体。一般情况下这种新表型由共转染的编码抗生素抗性基因提供.细菌Tn5转座子序列 （neo抗性基因）携带的氨基糖苷磷酸转移酶可以将G418转变成无毒形式.G418是一种氨基糖类抗生素,其结构与新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,它 通过影响80S核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞,也包括原生动物和蠕虫.是稳定转染最常用 的选择试剂.当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效 表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长.G418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛 应用.在进行转染时细胞膜受到影响,抗生素可能对细胞产生较大影响,加上G418有杀菌作用,所以有人主张转让时不加其它抗生素.其实G418本身有很好 的杀菌效果,在用G418进行筛选的过程中很少会发生污染.但有一点,在脂质体转染时所 用培养基中最好不加任何抗生素.可能是脂质体对细胞膜有影响,可能此时加抗生素对细胞损伤较大.因为庆大霉素、链霉素、G418均是氨基糖甙 类药物,其药理作用完全一样.所以没有必要再用,而且由于另外抗生素的添加实际增加氨基糖甙类药物的浓度,剂量有误差,不利于各实验室之间的交流,在实际 操作中,培养液中有抗生素对细胞培养与筛选影响不大.Protocal1.G418的配制： 取1g G418溶于1ml 1M的HEPES液中,加蒸馏水至10ml,过滤消毒,4度保存.2.细胞培养：取待测培养细胞,制备成细胞悬液,按等量接种入多孔培养板中,培养6小时左右开始加药.3.制备筛选培养基：在100g/ml～1000g/ml范围内确定几个梯度,比如先做个100g/ml、400g/ml、800g /ml、1000g/ml,按梯度浓度用培养基稀释G418制成筛选培养基.4.加G418筛选： 吸除培养孔中培养基,PBS洗涤一次,每孔中加入不同浓度的筛选培养基.5.换液：根据培养基的颜色和细胞生长情况,每3~5天更换一次筛选培养基.方法同4.6.确定最佳筛选浓度：在筛选10～14天内能够杀死所有细胞的最小G418浓度即为最佳筛选浓度.在第一轮就筛选出最佳G418浓度的可能性不 大,最有可能的是出现这种情况：用某一浓度G418的量在筛选14天后还不能杀死细胞,而用下一个梯度的G418的量在10天前就看不到活细胞了.假如是 400g/ml不能杀死细胞,而800g/ml在第5天就把所有细胞都杀死了,则可以再用500g/ml、600g/ml、700g/ml进一 步筛选,以确定最佳筛选浓度!心得：由于特性明确的细胞系G418的最佳用量还是比较稳定的,所以有时候不需要在这么大范围内进行筛选。

② 抗生素怎样阻碍细菌DNA的复制和转录

yeah这个今天上课刚学！！
主要是通过抑制DNA复制和转录当中的一些限速酶的活性来起作用的回。例如：喹诺酮类抑答制细菌的DNA回旋酶，起杀菌作用；利福平特异性抑制DNA依赖的RNA聚合酶，阻碍mRNA合成来杀菌；磺胺类抗菌药则是通过影响细菌内叶酸代谢，使细菌体内核苷酸合成受阻，使细菌的繁殖不能进行。有一个背景知识，就是细菌不能通过环境中的叶酸来合成核苷酸，而是以蝶啶和PABA为原来，在各种酶的催化下合成核苷酸，磺胺类是通过与PABA竞争酶来起作用的。

③ 滥用抗生素往往会导致细菌耐药性的产生．（1）细菌抗药性变异的来源属于______．（2）尽管在细菌菌群中天

（1）细菌是原核生物，遗传物质是DNA，但没有染色体，因此抗药性变异的来内源不是基因容重组和染色变异，只能是基因突变．
（2）在抗生素刚被使用的时候，能够杀死大多数类型的细菌．但少数细菌由于变异而具有抵抗抗生素的特性，原因只有少数细菌体内含有抗药性基因．
（3）细菌耐药性的形成是经过抗生素的长期自然选择，出现了抗药性较强的菌株，且逐渐增强．其实质是种群的基因频率发生了定向的改变．
（4）有性生殖杂合子可以保存隐性基因，因此得到显性纯合子组成的种群需要很多代．
故答案为：
（1）基因突变
（2）有抗药性基因的个体占极少数（抗药性基因频率极低）
（3）定向选择菌群中抗药性基因频率增加
（4）隐性基因可通过杂合子保存下来

④ 微生物产生的抗生素为什么不能杀灭自身

抗生素对微生物作用的机理有很多种。比如有些抑制DNA复制，有些抑制多糖形成，等等等等。版微生物可权以通过改变自身一些结构或敏感位点，蛋白来对自己分泌的抗生素失去敏感。也有些抗生素对分泌的微生物本身根本无效。

⑤ 抗生素基因与抗生素抗性基因的作用

抗生素的作用就是区分转基因是否成功。因为携带抗生素的抗性基因和你内希望转的基因是连在容一起的，如果转化成功，那么抗生素基因也在里面，通过在抗生素作用下进行抗性筛选，就能得到阳性的克隆子。一般做微生物的转化用抗生素基因，对受体几乎上没什么影响，不会遗传。
如果是植物或动物，是不会用抗性基因的！试验模型的植物动物，一般都是转一个gfp
也就是绿色荧光蛋白基因，这个基因转进去以后，在紫外照射下可以发出荧光！

⑥ 细菌耐药怎么办别滥用抗生素

现在又出现了能抵御一切抗生素的NDM-1，实在是让人们感到岌岌可危，也许有一天人类患病后无药可用。 面对全球性的细菌耐药，如果能从根源上找到原因，有可能解决这一难题。细菌耐药分为天然耐药性和获得耐药性，前者是指细菌天生就拥有的耐药性，而后者是在后天的生存环境中产生的。例如，当人类长期应用抗生素时，占多数的敏感菌株不断被杀灭，耐药菌株就大量繁殖，代替敏感菌株，使得细菌对某种和某些药物的耐药性不断升高。尽管细菌的天然耐药和获得耐药孰重孰轻存在争论，但获得耐药已经是当今人与生态环境的一个突出现象。 面对这种情况，当然有不同的对待方式。一些科学家认为，对待细菌耐药只能用杀伤力更强大的药物来消灭耐药菌，这就是大棒政策。因为人类可以利用科技的力量战胜一切，更何况小小的细菌。这不仅是一些主流科学家的观念，而且更符合大量制药厂商的利益。在这样的思路之下新药研制层出不穷，而针对细菌耐药特点的科研成果也不断出现。 细菌耐药的生物和药理学原因有两个，一是细菌基因组上抗生素作用靶点的基因突变，使抗生素失去作用；二是细菌获得了编码特殊酶的基因，这种酶可以分解抗生素，使抗生素失去活性，这样的基因就是耐药性基因。这种基因位于细菌细胞内称为质粒的环状DNA上。质粒可以从一个细菌进入另一个细菌，耐药基因也从一个细菌传到另一个细菌。因此，美国伊利诺依大学的化学家保罗·赫根勒特尔发现了一种可以将携带耐药基因的质粒从细菌细胞内驱逐出去的方法。从这种原理入手，可以研发更新的摧毁耐药细菌的药物。 还有研究人员提出，可以针对细菌赖以抗药的酶来杀灭耐药菌。例如，β-内酰胺类药物是临床应用最广泛的抗菌药物，而一些细菌由于有灭活酶或钝化酶，可以抵御抗生素的攻击。英国研究人员这次在南亚和英国病人身上发现的这种耐药菌就是一种拥有β-内酰胺酶新基因的细菌，故称为“新德里金属β内酰胺酶”，几乎所有抗生素都对它无效，其中包括效力最强的碳青霉烯类。

⑦ 抗生素滥用与DNA污染

本文说明的中心是人类滥用抗生素已经给自身带来了恶果，使得生存空间及环境被污染，让人一出生即面临耐药菌的威胁，这也是这一片热土成为癌症发源地的原因之一。

⑧ 转基因木瓜中含有的抗生素抗性基因能转移到人身上吗

不能，我们来看一下相关知识，抗生素抗性基因：使细菌对氨基苄青霉素，氯霉素等抗生素产生抗性。在一个细菌群体中，不是所有的个体都有该基因。因为这种基因往往是通过基因突变产生，所以基因频率较低。它用到了基因工程，基因工程（genetic engineering）又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程技术为基因的结构和功能的研究提供了有力的手段。对基因进行克隆，修饰，转移等操作从而获得生物新性状的一系列技术的总称，手段有化学的有物理的，研究对象是生物的基因，又是一系列的技术。或者理解为 将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制，转录，翻译表达 。

1 由于摄入消化道内的外源DNA会被胰液和肠液中的核酸酶降解为寡聚核苷酸片段以至核苷酸分子，因此完整的抗生素抗性基因转入人体的可能性极低（比中彩票头奖低多了）
2 市售（番）木瓜基本都是转基因木瓜
3 是的，含有卡那霉素抗性和四环素抗性基因。
4 处于实验室研究阶段的转基因水稻一般从方便科研角度出发，是带有抗生素抗性基因的。但可商业化的转基因水稻，例如黄金大米，采用的是无抗性体系，即其不带有抗生素抗性基因

⑨ 科学家将人的生长激素基因与某种细菌（不含抗生素抗性基因）的DNA分子进行重组，并成功地在该细菌中得以

（1）由图可知，①过程中获取目的基因的方法是反转录法（逆转录法）．
（2）细菌繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少，是基因工程中理想的受体细胞．
（3）构建基因表达载体时，先用限制酶酶切割质粒，再用DNA连接酶将质粒与目的基因连接形成重组质粒．
（4）由图可知，构建基因表达载体时，目的基因的插入破坏了四环素抗性基因，但没有破环氨苄青霉素抗性基因，因此导入重组质粒的细菌能在含有氨苄青霉素的培养基上生存，但不能在含有四环素的培养基上生存．若将细菌B先接种在含有氨苄青霉素的培养基上能生长，说明该细菌中已经导入外源质粒，但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因；若将细菌B再重新接种在含有四环素的培养基上不能生长，则说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒．
（5）检测工程菌中的生长激素基因是否转录出mRNA，可采用分子杂交技术；检测生长激素基因是否翻译出生长激素，可采用抗原-抗体杂交技术．
故答案为：
（1）反转录法（逆转录法）
（2）繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少
（3）DNA连接酶
（4）氨苄青霉素 四环素
（5）分子杂交 抗原-抗体杂交

⑩ 模拟实验的方法探究这种抗生素能否阻断细菌DNA和人体DNA的转录过程。

解析：(1)甲试管中DNA为模板，核糖核苷酸为原料，生成物必然是RNA，说明模拟的是转录过专程。乙试管中有属mRNA，原料为氨基酸，说明模拟的是翻译过程。(2)翻译过程需要mRNA、氨基酸、酶、ATP还需要运载工具tRNA，场所是核糖体。(3)要探究这种抗生素能否阻断细菌DNA和人体DNA的转录过程，需要设置对照实验，实验变量为抗生素的有无，而观察指标为是否有RNA生成。因要探究抗生素对人体DNA和细菌DNA转录的影响，故需有两组对照。

答案：(1)转录翻译(2)tRNA核糖体

(3)第二步：向A试管滴加适量一定浓度的抗生素水溶液，B试管中滴加等量的蒸馏水，同时A、B试管中加入等量相同的细菌DNA；向C试管滴加适量一定浓度的抗生素水溶液，D组滴加等量的蒸馏水，同时C、D试管中加入等量相同的人体DNA第三步：把A、B、C、D 4支试管在相同且适宜的条件下培养一段时间后，检测4支试管中有无RNA的生成
(4)4A试管中无RNA生成，B试管中有RNA生成，C、D试管中均有RNA生成